kloetzel下午

心脏雌激素受体α:不同的膜和核分布模式和雌激素的调节。

  • PS. t。 J. Hematol。
    调查全扫描MS光谱,1 microScan(
    J. Clin。 oncol。
    UL1 / CDC53.
    调查全扫描MS光谱,1 microScan(
    ,psign测试
    ,将组织型和诱导型蛋白质亚亚基在细胞骨分数中的比较,从心脏和肝脏纯化20秒。每条泳道含有25μg胞质级分或1μg纯化的蛋白酶体。
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  • PS. t。 J. Hematol。
    调查全扫描MS光谱,1 microScan(
    罗宾逊C.V.
    UL1 / CDC53.
    调查全扫描MS光谱,1 microScan(
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  • 王G.W.
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  • PS. t。 J. Hematol。
    调查全扫描MS光谱,1 microScan(
较低的面板 更多的 //doi.org/10.1074/mcp.M800058-MCP200
      20秒的蛋白酶体复合物是哺乳动物细胞中细胞内蛋白质降解机制的主要贡献者。系统施用蛋白酶体抑制剂对抗疾病(例如 癌症)导致阳性结果以及对手的影响。后者至少部分地归因于对不同组织中这些配合物的蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质缺乏的理解缺乏理解。因此,我们进行了一种蛋白质组学研究,以表征了20次蛋白酶体复合物及其在心脏和肝脏中的特异性器官特异性反应。从相同的遗传背景与相同的小鼠菌株分离心脏和肝脏20秒蛋白酶蛋白。我们检查了这些蛋白酶体复合物的分子组合物,复杂的组装,翻译后修饰和与伴侣的关系。我们的结果揭示了20 S蛋白瘤的器官特异性分子组织,具有翻译后修改的杰出模式以及独特的复杂组装特性。此外,蛋白质组多样性伴随着这两个器官表现出的蛋白水解模式的功能性异质性。特别地,心脏和肝脏显示出两种蛋白酶体抑制剂,环氧细胞和Z-Pro-NLE-ASP-H不同的活性曲线。最后,心脏和肝脏从这些蛋白酶的相关合作伙伴中表现出对比的调节机制。哺乳动物20次蛋白酶体复合物的功能异质性强调了在相同基因组的背景下的器官中发散蛋白质组的概念。
      使用三种不同的方法来定量地确定心脏和肝脏20 S蛋白酶体中三个β亚基(β1,β2,β5)的组装和其三种诱导的柜台(β1i,β2i,β5i)。首先,使用在心脏和肝脏20 s蛋白质组中检测到的给定肽的两个最高峰的平均峰面积进行心脏和肝脏20 s蛋白酶体亚基的定量。无需心脏和肝脏的自由标记LC-MS / MS定量20 S蛋白蛋白酶的定量表明,与心脏相比,肝脏中的诱导亚基(β1i,β5i)显着提高了较高量的诱导亚基(
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      • 钱W.J.
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      )。这三种蛋白水解活性β亚基(β1,β2,β5)可以用诱导型对应物(β1i,β2i,β5i)代替(
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      Calyculin A,PP1,DMAT(CKII抑制剂)或CKII对纯化蛋白酶蛋白水解活性的表征的表征。
      ,
      • arizti p.
      • 蛋白质组学。
      • 孟德利
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      • 艾略特P.
      • 佩雷斯C.
      多种相关蛋白调节蛋白酶体结构和功能。
      ,
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      • 巴恩斯。
      • 戈麦斯A.V.
      ,加入100 n后50分钟的纯化20s蛋白蛋白酶50分钟的蛋白水解活性
      为了通过BN-PAGE分离纯化的20秒蛋白酶体,将1-3μg纯化的蛋白酶体样品(以1μg/μl)与BN样品缓冲液(15μl)混合。如前所述制备BN-凝胶(
      该蛋白质体满足真核细胞中的各种功能,预计20 s蛋白酶与可以调节其活性的不同蛋白质相互作用。任何两种蛋白质协会都受到表达水平和降解水平的管辖,自由的比例
      • yeh e.t.
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      • voortman J.
      • 张继夫
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      o标记程序如文献中所述类似地进行(
      ,
      • yeh e.t.
      • voortman J.
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      • 张继夫
      ,使用LC-MS / MS分析鉴定来自BN-PAGE 20 S带中存在的NEDD8的肽。
      DTT)。将沉淀物透析在4升透析缓冲液中过夜)。然后通过逐步盐洗脱(从GE Healthcare从Ge Healthcare的Q Fastflow XK 26/40的Q Fastflow XK 26/40分离透析液(200ml 45%缓冲液B;然后200ml 75%缓冲液B,最后为200ml 100 %缓冲B.缓冲器A:20米
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      用定量质谱法鉴定蛋白质复合物的动态交互。
      EDTA,0.05%Nonidet P-40和0.001%SDS(pH7.5)。通过添加10μl10×溶液(250-5000μ
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      • 尚y.
      • 安德森D.J.
      ,对心脏和肝脏细胞骨馏分抑制20s蛋白酶体活性的比较。 *,
      )。使用PPI和CC测量两种蛋白质之间的关联程度。 PPI和CC是验证PP1,CKII,NEDD8和ZFHX4与蛋白酶组的独立措施,并与核心20 S蛋白酶体(
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      免疫印迹还证明NEDD8是20次蛋白酶体复合物的一部分(
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      ,
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      ,来自心脏β6蛋白酶体亚基的肽的质谱,其在精氨酸上是单甲基化的;
      o:
      ),由E1泛素激活酶UBA2激活,然后与E2样酶,UBC12连接。与泛素一样,NEDD8与靶向蛋白共价(Neddylation)连接;然而,NEDD8的生物学功能尚不清楚。 NEDD8在开发和分化中发挥重要作用,可能会调节E3泛素连接酶复合SCF(
      搜索MS / MS光谱与国际蛋白质指数鼠标数据库3.24(包含52,326蛋白)的搜索,其中包含续集搜索引擎(BioWorks 3.3)。设定了半胱氨酸氨基甲酰化的固定修饰。将差异改性设定为甲硫氨酸的氧化,以及精氨酸和赖氨酸单 - 和二甲基化并允许一个错过的胰蛋白酶切割。滤波器标准被设置为通过跨相关的显着阈值
      1搜索MS / MS光谱与国际蛋白质指数鼠标数据库3.24(包含52,326蛋白)的搜索,其中包含续集搜索引擎(BioWorks 3.3)。设定了半胱氨酸氨基甲酰化的固定修饰。将差异改性设定为甲硫氨酸的氧化,以及精氨酸和赖氨酸单 - 和二甲基化并允许一个错过的胰蛋白酶切割。滤波器标准被设置为通过跨相关的显着阈值
      电荷状态(2 + 1离子,2.2 +2离子,3.8 + 3离子)和0.001的概率阈值。所有已识别的蛋白质需要两个不同的肽。通过占所述给定肽的两个最高峰的平均峰面积来实现所确定的亚基的相对定量。峰值强度反对总高峰强度归一化。

      见文章

       o标记β1i肽。

      ,对心脏和肝脏胞质级分中20 S蛋白酶蛋白酶蛋白水解活性的比较。 *,
      • 威特S.
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      我们使用cookie来帮助提供和增强我们的服务和定制内容和广告。继续你同意m elestwier帮助m EDTA, 1 mm )。不同胰蛋白酶消化的心脏和肝脏20次样品的色谱图,其20 s蛋白酶体的主要成分不同( g 然后将含有20%乙腈的水将各自加入到两个样品中的一个中,并在37℃下温和振荡温育过夜。标记后,使用微磷脂柱除去固定的胰蛋白酶珠,然后通过乙腈进一步洗涤。这m ,P意义测试m MgCl2图3C. m )。精氨酸甲基化被视为常见的翻译后修饰,对蛋白质 - 蛋白质相互作用是重要的。在不久的将来可能在不久的将来发现更多甲基化蛋白质,其在编码甲基转移酶的哺乳动物基因组(超过1%)中的高百分比基因(m ,P意义测试m MgCl2图3C. m ),抗RPT4 19 S蛋白酶体(E2,m ,P意义测试m MgCl2图3C. m [email protected]m 然后随后的LC-MS / MS分析,我们描绘了天然20次蛋白酶体复合物的分子组织及其相关合作伙伴。这是关于对蛋白酶体抑制的特定器官抑制的第一蛋白质组学报告。我们的数据在这些器官中的20 s蛋白酶体复合物的蛋白质组生物学和蛋白水解功能中表现出显着的异质性。

       下载

      应该解决对应的通信:MRL BLDG的David Geffen医学院,MRL BLDG,675 CE Young博士,洛杉矶,加利福尼亚州博士,CA 90095。Tel.:310-267-5624;传真:310-267-5623
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      • J. Clin。 oncol。.
      • 克罗斯B.
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      • 摩尔。细胞。 BIOL。
      ©2009 ASBMB。目前由elsevier公司发布;最初由美国生物化学协会发表的生物化学和分子生物学。
      与重组CKII的所有三种肝脏活性为0.05与热灭活的重组CKII相比,与未滥用活动相比,抑制CKII。m 在新选项卡中查看高分辨率图像m tricine, 15 mm 哺乳动物组织中20S蛋白酶体复合物的对比蛋白质组生物学和功能异质性 - 分子m Tris-HCl,pH 7.8,0.1米m o标记和免疫印迹),我们表明,心脏和肝脏20秒蛋白酶的六个β亚基以不同的比例和图案组装。心脏和肝脏中蛋白酶体组装的调节机制仍有待确定。最近的莎莱克纸

       α3的Cc,具有PP1γ的α3;突出的区域有

      )。在胰蛋白酶消化后,回收的肽混合物在LTQ-MS仪器(Thermo Fisher Scientific,San Jose,CA)上进行了LC-MS / MS分析,采用验船泵系统使用反相柱(75μm,内径,10厘米;生物酶C18,5-μm粒径;新目标,Woburn,MA)。对于样品负载,流速为5μl/ min,分离250 nL / min。流动相A为0.1%甲酸,水中2%乙腈,流动相B为0.1%甲酸,乙腈中的20%水。用于分析的浅梯度:线性梯度从5%B至40%B超过70分钟,然后超过20分钟,最后恒定100%B持续9分钟。线性离子阱的离子转移管在200℃下保持; MS的正常化碰撞能量为35%n = 3).
      20秒的鸟氨酸脱羧酶降解通过NQO1调节。
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      • 年轻的G.W.
      • 肛门。生物学习。
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      在较高放大率下的正方形中的区域。
      ,
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      • 王X.
      • NISSUM M.
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      • 杨H.
      • 小组4.
      • eghbali M.
      出乎意料的血液中硼芝麻治疗患者的心脏毒性。
      )并涂在聚赖氨酸预渗透的盖玻片上(室温下1小时)。然后将细胞在冷丙酮(10分钟在-20℃)中或在4%多聚甲醛(室温下20分钟)中固定。使用10%山羊或驴血清,0.2%Triton X-100在磷酸盐缓冲的盐水(PBS)中,在室温下30分钟封闭非特异性结合。将细胞在4℃下用1%山羊或驴血清中的一抗孵育过夜,PBS中的0.2%Triton X-100。初级抗体是:抗PP1γ(1:300稀释,SC-6108; Santa Cruz Biotechnology。);抗CKII(1:100稀释,610444; BD Biosciences);抗NEDD8(1:100稀释,AB50280; ABCAM);抗ZFHX4(1:100稀释,H00079776-A01; Novus生物学);和抗α3(1:300稀释; Invitrogen)。用PBS(3×)洗涤初级抗体,将细胞与Alexa 488抗兔IgG(2μg/ ml)和Alexa 568抗小鼠IgG1(2μg/ mL)或Alexa 568驴防山羊一起孵育二抗(分子探针)在1%山羊或驴血清中,在室温下PBS中的0.2%Triton X-100在1小时内。用PBS(3×)洗涤二次抗体,使用延长抗衰落安装介质(Invitrogen)安装细胞。用激光扫描共聚焦显微镜(60倍,1.4 Na,浸泡)在〜0.050μm/像素(内部建造的奥林巴斯·氟染色或高分辨率共焦),用激光扫描共聚焦显微镜(60倍,1.4 Na,浸没)获得。为了提高空间分辨率,图像是三维盲解码(自动成像Inc.)。通过蛋白质邻近指数(PPI)和相关系数(CC)测量两种蛋白质之间的关联程度,使用最近发表的算法计算(
      • 戴维斯R.W.
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      • 沃尔兹T.
      • 小组4.
      • eghbali M.
      )LLVY-AMC。 β1和β2蛋白酶体活性的20 s测定缓冲液的最终组合物为25米
      )。简要介绍10g组织(心脏或肝脏)通过均质缓冲液中的聚硬化均化器均化(20米

       分子

      893.23(3+电荷)。蛋白质载荷由PONCEAT S污渍控制(m 趋势Cadiovasc。 Med。m NaCl, 1 mm 去除核和线粒体分数。然后用硫酸铵沉淀所得上清液(细胞溶质级分),收集40%至60%硫酸铵饱和的沉淀物,并重新悬浮在10ml透析缓冲液中(20米 g 20S蛋白水解活性测定在96孔不透明板中的总体积为100μl。 β5蛋白酶体活性的20 s测定缓冲液的最终组合物为25米 g 通过比较细胞溶溶胶中给定β催化亚基的水平在纯化的样品中的水平中,我们获得与组织之间直接相当的比率。总蛋白酶体亚基的比例(从细胞溶质级分中获得)

       分子和细胞蛋白质组学

      从其相关/组装的形式组装/相关的,与独立功能的蛋白质亚群。迄今为止,目前鉴定了许多蛋白酶体相互作用蛋白质( m HEPES, 0.5 mm 质谱仪揭示细菌20 S蛋白酶组装途径中缺失的链接。m和补充表3),我们还观察到心脏中的明显较低诱导β亚基。使用这一点m HEPES, 0.5 mm = 4.在100-500米的情况下,测定β1,β2和β5活性的心脏和肝脏细胞溶胶级分(每种25μg)m蛋白质是酶的多蛋白质复合物,其是遍在蛋白蛋白酶体系的中心。在不同的生物体中发现蛋白酶体复合物,并存在于所有哺乳动物细胞类型中。多次调查记录了许多人类疾病中泛素蛋白酶体系的缺陷。报告的病因是多种多样的,疾病表型正在稳步增加,大多数调查努力都集中在癌症中蛋白质体的参与。已发现抑制蛋白酶体对治疗多种骨髓和其他形式的肿瘤发生( g )。简而言之,首先用水洗涤固定的胰蛋白酶珠粒(寿命技术),然后加入每个胰蛋白酶消化的干燥肽(20%的消化体积),然后再次通过SpeedVac完全干燥。任何一个
      哺乳动物细胞中蛋白酶体复合物关联伴侣的共焦验证。m CC用于RPT4的核心邻近;突出的区域有m 采集在数据相关的采集模式下运行,以自动选择来自调查扫描的前五个最高强度的离子,3.0m )。将诱导亚基引入20秒的蛋白质体引起复杂组装的变化,改变它们的蛋白水解基质特异性。 20 S复合物的可变分子组织提供细胞,具有动态的蛋白水解能力,并提供功能性异质的可能性( p <酪蛋白激酶II的C8和C9亚基的C8和C9亚基的磷酸化及直接诱变C8磷酸化位点的鉴定。 p <,来自肝脏α2的肽,其在赖氨酸上二甲基化。 #代表甲基化的精氨酸残基。甲基化肽(β6)具有4.114的Xcorr和前体离子

       分子组成和组装 -

      将重组PP1(NEB)或15个单位的CKII加入到纯化的蛋白酶体中,在添加β1,β2或β5底物后30分钟测量蛋白水解活性。用在60℃下加热孵育的重组PP1或CKII孵育的蛋白酶蛋白用作对照。数据是至少三个独立实验的平均值。 *,
      • 社论
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      • 懦夫L.
      • 佩雷斯C.
      • ,0.5米
      • 张R.
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      • 懦夫L.
      ,PPI作为像素偏移的函数。具有抗核20 S蛋白酶体的免疫染色细胞(E1,
      本研究表明,尽管存在相同的遗传投入,但心脏和肝脏表现出20S蛋白酶体复合物中的对比蛋白质组生物学。催化活性β亚基的分子组合的差异以及独特的关联伙伴促进了这两个器官具有的差异蛋白水解后果。这些数据说明了20 s蛋白酶体的结构和功能特征在组织类型之间是非均相的。此外,心脏蛋白酶对药物环氧基蛋白的敏感性大得多,而不是肝脏。这可以解释为什么蛋白酶体抑制剂Vlccade对心脏细胞显示比正常结肠细胞更多的毒性(2免费注册用户名和密码
      NEDD8招募E2-ubiquitin至SCF E3连接酶。m/z 抗体,免疫印迹分析和共焦免疫组化 - 2铃木T.2 与未灭活的重组PP1相比,具有重组PP1的β5心脏活性0.05,与未抑制的活性相比,具有热灭活的重组PP1和抑制的PP1。 *, m/z Bortezomib治疗后严重可逆心衰竭结合非小细胞肺癌患者的化疗:案例报告。 18,从心脏和肝脏中纯化的20秒蛋白蛋白蛋白蛋白酶蛋白水解活性的比较。 *,2 0.05。峰值被标准化为集合中所有比率的中值,并且是三种实验重复的结果。 m/z.
      )。这些20个复合相关蛋白可以是底物,辅助蛋白质或与20 s蛋白酶体功能相关的酶。在这项研究中,我们使用蓝色天然凝胶来表征20个蛋白酶组合伙伴。 BN-PAGE允许在本地条件下进行多蛋白复合物的高分辨率分离。多粒蛋白复合物的最终电泳迁移率由Coomassie染料结合的量和复合物的尺寸和形状测定( 尼克斯D. ),酪蛋白激酶II,蛋白质磷酸酶1,CALPAIN 2,应激-70蛋白线粒体前体,90kDa热休克蛋白,精氨酸N-甲基转移酶1和附箱A2(补充图4)。酪蛋白激酶II,蛋白质磷酸酶1,热休克蛋白90,蛋白激酶A,蛋白质磷酸酶2a,伸长因子2和心脏和肝脏的NEDD8(

       182021个问题

      史密斯第二,R.D. 18以前关于蛋白酶组合合作伙伴的研究已被证明已成功(
      • 分享
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      • ,psign测试
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      使用先前描述的方法从ICR小鼠的心脏和肝脏纯化20S的蛋白酶体复合物(
      ,
      • P302-315,
      • 下一个数字
      • 等等。
      • BMC癌症。
      • Tricine,15米
      • iwai K.
      • 10月1日,
      • Scopus(824)
      • 大阪F.
      • Scopus(114)
      • 戈麦斯A.V.
      • 图。1B
      • 安德森G.A.
      • 参考
      • 全文PDF.
      • 田云田
      • papandreou c.n.
      Calyculin a(pp1抑制剂; upstate)10分钟或100 n coux o. 哺乳动物蛋白酶体亚群,具有不同分子组合物和蛋白水解活性。
      ),而底层机制则不明白。我们假设存在蛋白酶体结构和功能的组织异质性,这可能有助于在不同器官中观察到的二分反应。 18创造性的公共归因(CC到4.0) 16评价组织异质性和对蛋白酶体抑制的敏感性,我们检查了两种蛋白酶体抑制剂对心脏和肝脏蛋白水解功能的影响。我们的数据显示,心脏对环氧病毒的易感性高于肝脏( 16 图像 18)。虽然先前未检测到伸长系数2和20 s蛋白酶物之间的相互作用,但这些平移伸长因子可能涉及共同平移受损的蛋白质的降解,连接蛋白质合成和降解途径(

      英语

      98%纯度);使用组合多维色谱和BN-PAGE的方法(补充图2)。在BN-PAGE上可视化的20次复合物( >)与心脏中的锌手指同源源4的存在形成对​​比(补充图7)。在净化过程中更弱束缚或瞬态蛋白质的不可避免的损失突出了蛋白酶体复合物的活力以及难以开发联合伙伴的综合地图。对于特定器官共用和独特的20次蛋白酶组合伴侣的日益增长的列表增强了蛋白酶体复合物功能多样性的潜力。图7C.o标记β1i和β5i的肝脏/心脏的浓度分别为3.17±0.22和2.96±0.21。最后,使用第三种方法来研究使用免疫印迹肝脏中肝脏诱导β催化亚基的潜在更高水平。奥德西红外成像的纯化20次蛋白酶
      • 图3B.
      • 王G.W.
      • 罗宾逊C.V..
      关于作者Glen W. Young的函授信息
      o:
      图缩略图GR4.
      Fig. 1精氨酸甲基化:蛋白质功能的新出现调节因子。ANEDD8的靶向NUB1的NEDD8及其缀合物的NUB1。 B上清液),使用特异性蛋白酶体抑制剂环氧蛋白或Z-Pro-NLE-ASP-H进行对照。每个孔含有25μg细胞溶质级分,并且如上所述进行测定,用于纯化的蛋白质。

       是较高放大率的区域。

      NEDD8系统对于小鼠细胞周期进展和形态发生途径至关重要。Fig. 2, Fig. 3, Fig. 4检查了三种蛋白水解活性(β1胱天蛋白样,β2胰蛋白样,β5胰蛋白样)的胞质溶胶20 s蛋白酶体(第2小组在该研究中,我们研究了来自相同动物菌株的心脏和肝20次蛋白酶的分子组合物,复杂的组装和翻译后修饰。此外,我们评估了两种不同器官中不同20秒的蛋白质组生物学的功能影响。使用蓝色聚丙烯酰胺凝胶电泳(BN-PAGE)
      图缩略图GR1.
      Fig. 2作者诚信宗的函授信息AEDTA和0.03%SDS(pH7.5)。通过添加10μl10×溶液(250-5000μ n vinh J. p < 0.05. B激活在线访问权限 1816是β5和β1i的组装索引的放大视图。 n vinh J. p <20S蛋白酶体中该蛋白酶体亚基的量纯化于胞质溶液馏分(仅组装的亚基)。这 电子邮件 多发性骨髓瘤的新疗法。 1816荧光基底。 *,
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      Fig. 3在纯化的心脏或肝20次孵育的纯化的心脏或肝20 s蛋白蛋白上进行活性测定法A)。这是甲基化蛋白酶体亚基的第一个报告。甲基化对蛋白酶体亚基的具体作用是未知的,但对于与其相关伙伴的互动可能是重要的。 B然后将O标记的样品合并并通过SpeedVac干燥。如前所述,将样品施加到质谱仪上。结果是三个独立实验重复的平均值。将峰值归一化为蛋白酶体亚基的所有比率的中值。 C)表明,β亚基的组装可能涉及铅化加工。蛋白酶体亚基的降解也是未知的,并且可能涉及先前组装的蛋白酶体亚基释放到胞质溶质中以进行降解。 尼克斯D. )。几种其他具有特征良好的蛋白酶体相互作用的伴侣,蛋白激酶A(PKA)和蛋白质磷酸酶2a(pp2a)( kim J. PS. 关于作者Oliver Drews的函授信息
      可以在细胞内同时存在自由蛋白酶体亚基,部分组装的蛋白质组和完全组装的蛋白质体。蛋白酶体的组装和分子组织是复合物,只需两组7α和7β亚基需要20次蛋白酶体组件。三个β亚基(β1,β2,β5)可以用它们的诱导型对应物(β1i,β2i,β5i)代替,所有这些都具有催化活性。我们之前已经显示了来自正常成人心肌的20 S蛋白酶体中所有六个β亚基的平行整合(p < 0.05, n = 3) ( 接触 J.蛋白质组。 1618关于作者Mansoureh Eghbali的函授信息 推特 )。还研究了蛋白酶体抑制剂对纯化心脏和肝脏20次复合物的影响( 1618)。每20秒的蛋白酶组成由四个堆叠环组成,内环包含七个β亚基(形成中央催化室)和包含七个α亚基的外环。 β亚基(β1,β2,β5)中的三个在其氨基末端后翻译后裂解,得到活性蛋白酶( 文章 o消化后心脏和肝蛋白酶的贴标(
      )。本研究中鉴定的所有组织类型中的20秒蛋白酶蛋白酶的普遍存存和本研究中鉴定的异质性建议在未来的治疗法中施加系统施用蛋白酶体抑制剂。 尼克斯D. I期I试验蛋白酶体抑制剂Bortezomib在高级实体瘤患者中观察到雄激素无关的前列腺癌。Fig. 3, A 最佳 C KCL)。从75%缓冲B洗脱峰回收富集的20S蛋白酶体,并以42,000rpm(4°C; Ti 45固定角转子从Beckman离心19小时。收集沉淀并通过另一个强离子交换柱(来自GE Healthcare的MonoQ GL5 / 50)进一步通过17.5柱体积的梯度洗脱来解决。在〜60%缓冲液B中回收纯化的20秒蛋白酶。Fig. 3 非蛋白酶体蛋白的鉴定。仍然检测包括PP1,CKII,PKA和PP2A的几个关联蛋白质,以在共免疫沉淀后与20S蛋白酶体复合物相关联(补充表8)。鉴定通过BN-凝胶,免疫组织化学和共免疫沉淀的组合将蛋白质相关联,这提供了相当的置信性,即相互作用在生物学上相关。

       功能关联合作伙伴 -

      DMAT(CKII抑制剂)20分钟,并在添加基板后30分钟的所有三种蛋白酶体蛋白水解活性测量。对于重组研究,36 n 沉Y. 请在提交搜索之前输入一个术语。
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      ,来自心脏β6蛋白酶体亚基的肽的质谱,其在精氨酸上是单甲基化的;
      ,心脏和肝脏20 s蛋白酶在天然凝胶上运行,转移到硝酸纤维素,并用多克隆抗NEDD8和单克隆抗β7探测。
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      )。相对于鉴定的20 s蛋白酶体亚基及其序列覆盖率,三个独立的心脏20次样品非常相似(补充表2)。这17个已知亚基的序列覆盖率为心脏的27.4%±2.9%(β1i)至69.7%±2.9%(α1),而肝脏的序列范围为40.9%±4.8%(β2i)至64.7%± 6.9%(β1)。Fig. 5,使用来自肝脏和心脏的相同肽的两个最高峰的平均值进行定量。小W. BIS-TRIS,阴极的0.02%Coomassie G250。用浓缩的BN样品缓冲液调节蛋白质样品,终浓度为75米小W.通过MS / MS分析,鉴定所有17种已知的蛋白酶体组分和最丰富/易于检测的相互作用蛋白(补充表2,6和7)。我们的数据表明,关联蛋白在亚化学计量的量(与其他公布的报告一致)中参与了这些20次蛋白酶体(
      CKII抑制剂DMAT。
      Fig. 4,使用LC-MS / MS分析鉴定来自BN-PAGE 20 S带中存在的PP1的肽。A)。加入CKII至肝20 S蛋白酶蛋白酶蛋白质显着降低了所有三种蛋白水解活性,而CKII则不会影响心脏20次蛋白酶体。 B, Scopus(33),cc直方图。 α3的PPI为0.87,具有邻近PP1γ的α3,表明高度的关联。 克莱默w.a.)。添加CKII至肝脏20秒的蛋白质显着降低了肝蛋白酶的所有三种蛋白水解活性而不影响心脏蛋白酶体( m/z 高通量二维蓝母电泳:一种用于线粒体功能蛋白质组学的工具和信号配合物。 m/z 怀孕期间心脏肥厚的分子与功能特征。PS o:
      图缩略图GR8.
      Fig. 5,纯净的小鼠心脏和肝20 s蛋白酶的蓝色天然凝胶。A)。还通过将核心20S复合物与纯化的20次蛋白酶体制剂和随后的MS共同免疫沉淀核心20s络合物来验证相关蛋白质 B从心脏和肝脏纯化20次蛋白酶蛋白蛋白蛋白的翻译后修饰的比较。 C了解蛋白酶组合和调节:对心血管医学的重要性。 D,比较纯化的20秒蛋白酶体活性从心脏和肝脏的抑制的比较。

       蛋白酶体免疫沉淀 -

      调节小鼠心脏20 s蛋白酶:将合作伙伴的作用。
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      • Embo J.
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      收购了400-2000),然后获得了五个次次扫描的MS
      ,
      • 图8D
      • 研究
      由于蛋白酶体抑制剂Bortezmib,骨髓瘤患者急性严重心脏衰竭。
      和补充表5)。还比较了其他亚基(α3,α5和α7),虽然肝脏含有较高量的α亚基,但在心脏中α3,α5和α7亚基的水平相对于肝脏细胞骨分数没有显着差异(观察到辅助图8)。这表明在心脏和肝脏之间的这些蛋白酶体亚基表达水平没有大量的变化。 Fig. 5 )。在我们的研究中,BN-PAGE显示的天然20 S复合物被MS / MS分析,以便将合作伙伴识别关联。发现九个不同的关联伴侣在心脏和肝脏中稳定地与天然20次蛋白酶体复合物相互作用,包括伸长因子2,90kDa热休克蛋白,应激-70蛋白线粒体前体和Calpain 2催化亚基(辅助所示的光谱图4)。
      ,在添加10 n后50分钟的纯化20s蛋白蛋白酶体的蛋白水解活性。Fig. 5同位素标记的氨基酸掺入率(CILAIR)的比较提供了研究组织分泌物的定量方法
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      )。简而言之,在Bio-rad Protean II Minigel系统中施放6%凝胶。使用铁蛋白(440和880kDa; Sigma-Aldrich)作为分子量标记物。缓冲区为50米 Fig. 5 我们研究了来自心脏和肝脏的20 s蛋白酶的组成,组装,翻译后修饰,功能性关联伴侣和蛋白水解功能(补充图1)。这些两个器官的蛋白质组生物学和蛋白水解功能总结在补充表1中。使用纯化的20 S络合物研究蛋白质组生物学(
      全国健康机构授予HL R01-63901,HL R01-65431和HL P01-80111(至PP),HL BRG 088640(至ES),AHA 0160144B(至AG )和aha 0715004y(到gy)。这项工作也得到了Theodore C. Laubisch(P. P.)的捐赠。本文的出版费用部分按付款方式部分支付。因此,本文必须根据18 U.S.c,标明“广告”。第1734节仅表明这一事实。Fig. 6)。使用甲基特异性抗体的天然和二维凝胶中的心脏和肝蛋白酶的免疫印迹表明,一些蛋白酶体亚基是甲基化的(补充图5)。未发现纯化的20S蛋白酶染色,均稳定,亚甘氨酸 - 乙酰化或谷胱甘肽(补充图6)。Fig. 6, deva r. 重组PP1加入纯化的20秒蛋白酶体。其他蛋白水解活性显示出没有可检测的效果。数据平均三个实验。 *,n )。观察到这两种器官的蛋白酶体函数中的明显图案:肝细胞溶质20 s蛋白酶的胰蛋白酶样蛋白水解活性显着大于心肌胞嘧啶20 s蛋白酶体的蛋白质蛋白酶,而心脏细胞溶质的胱天蛋白酶和胰蛋白酶样蛋白水解活性20 S蛋白酶大于肝细胞溶胶20次蛋白酶体的蛋白质。
      条款和条件
      Fig. 6人脐静脉内皮细胞的蛋白质组学应用于依托泊苷诱导的细胞凋亡。 图7A o标记,数据在数据相关模式中类似地获取数据,其中1个全ms扫描,后跟MSA1, 例如 隐私政策A2, ,PPI作为像素偏移的函数。A3 o: a1a3 允许定量给定亚单元的水平。 A4肿瘤抑制剂P53和P73的泛素独立于突引的蛋白质降解机制。 A5材料和方法 尼克斯D. 0.05。<0.05. A6LC-MS / MS-蛋白质识别 唐格。,具有抗20秒蛋白酶体α3的免疫染色细胞(D1, 例如 第8卷,问题2 文本B3 o: b1b3 )和α3和pp1γ的覆盖层( B4映射小鼠心脏26秒的蛋白酶体复合物。 B5关于作者Aldrin V. Gomes的函授信息 p < 0.05. B6LC-MS / MS-蛋白质识别 tu,具有抗20秒蛋白酶体α3的免疫染色细胞(B1, 例如 文章和体积 图缩略图GR5. c1c3 )和α3和pp1γ的覆盖层( C4关于作者Haojie Lu的函授信息 C5,CC对于α3,邻近CKII;突出的区域有 p < 0.05. C6LC-MS / MS-蛋白质识别 小组3.关于作者的函授信息yueju wang 例如 ),抗CKII(B2, 关闭图形观众 d1d3 )和α3和pp1γ的覆盖层( D4心脏和肝肝20次蛋白酶体亚基的定量。 D5,cc直方图。 PPI为RPT4的核心邻近0.82。 p < 0.05. D6)。在本报告中,使用三种独立的实验方法(标记免费量化, 例如 文章标题,摘要,关键词 elestvier的开放访问许可策略 e1e3 ),与我们以前的发现一致( E4关于作者peipei ping的函授信息 E5HEPES,0.5米 尼克斯D. ,CC对于CKII的α3邻近;突出的区域有 p < 0.05. E6LC-MS / MS-蛋白质识别

       J.Mol。细胞。心肺。

      凝集素亲和层析和糖蛋白酶接近的组合结果基本上改善了糖蛋白组的覆盖率 图7D 和补充表5)。这些比率或组装指数比较了心脏和肝脏将亚基掺入成熟蛋白酶体中的能力。 β2,β5,β1i和β5i的组装指数值比心脏更大,β2i为例外。这提供了进一步的证据表明肝脏20 S蛋白质体在肝脏中保持更高水平的诱导β亚基(
      登录到您的帐户
      Fig. 7已发布,MCP纸,2008年10月17日,DOI 10.1074 / MCP.M800058-MCP200A)。共聚焦数据是每种制剂的四种不同小鼠制剂和8-10个细胞的代表性图像。 p < 0.05; n = 4. B蛋白酶体介导的分类蛋白质的降解涉及翻译伸长因子1a。 p < 0.05; n 与心脏和肝脏20次复合物相关的PP1表现出心脏和肝脏的不同功能作用(m 独立数据的收购 p < 0.05; n = 5. C)。使用质谱和免疫印迹我们提供了蛋白酶体甲基化的第一种证据( p < 0.05; n = 4. D免疫印迹,肝脏肝脏在心脏和肝脏中的自由和组装20S蛋白酶体亚基的比较。
      图缩略图GR6.
      Fig. 7已发布,MCP纸,2008年10月17日,DOI 10.1074 / MCP.M800058-MCP200A)。共聚焦数据是每种制剂的四种不同小鼠制剂和8-10个细胞的代表性图像。 p < 0.05; n = 4. B蛋白酶体介导的分类蛋白质的降解涉及翻译伸长因子1a。 p < 0.05; n 与心脏和肝脏20次复合物相关的PP1表现出心脏和肝脏的不同功能作用(m 独立数据的收购 p < 0.05; n = 5. C)。使用质谱和免疫印迹我们提供了蛋白酶体甲基化的第一种证据( p < 0.05; n = 4. D免疫印迹,肝脏肝脏在心脏和肝脏中的自由和组装20S蛋白酶体亚基的比较。
      在4°C下2分钟。将上清液除去后,将蛋白酶结合的蛋白A / G珠在95℃下在SDS-PAGE缓冲液中孵育5分钟,然后在12%SDS-PAGE凝胶上运行。用胰蛋白酶消化凝胶,随后通过LC-MS / MS分析。 ping p.)。与肝脏相比,心脏20秒的蛋白酶对环氧基蛋白抑制高度敏感,如它们各自的β5胰凝乳蛋白素样活性所示。图8C.与26秒蛋白酶多肽链伸长因子-1复合物的受管相互作用 图。2B ,对心脏和肝脏纯化的20秒蛋白酶蛋白磷蛋白酶的比较。每条通道含有2μg心脏蛋白酶体或2μg肝蛋白酶体。
      如果地址与有效的帐户匹配,则会将电子邮件发送到__email__,其中包含重置密码的说明Fig. 8EDTA,1%NONIDET P-40,GE Healthcare的蛋白酶抑制剂混合物与兔抗α3抗体(每5mg蛋白2μg抗体)和10μl蛋白A / G-Sepharose树脂(Santa Cruz Biotechnology)一起孵育,过夜在4°C。样品以1,000×离心 数字 用二维天然电泳分析蓝色天然电泳与膜蛋白复合物分离的分子量和低聚态分析。体内免疫印迹表明,肝20 S蛋白酶含有较高的相对量的磷酸化的Ser,Thr和Tyr残留物,而不是心脏20秒的蛋白酶体( 乔X. o:
      图缩略图GR3.
      Fig. 8来自罗氏的DTT,蛋白酶抑制剂混合物和锡格玛的磷酸酶抑制剂混合物)。将匀浆离心2小时25,000×A泛素 - 蛋白酶体蛋白水解途径:用于构建的破坏。m 在较高显示放大率下方的区域是正方形中的区域。 B下载数字(PPT)(在新标签中打开)m 将蛋白酶体亚基完全集成在成熟20的成熟中(从纯化的20秒蛋白瘤获得)被称为“组装指数”( p < 0.05. CNEDD8的表征,发育下调的泛素样蛋白。m D3)。 D哺乳动物组织中20S蛋白酶体复合物的对比蛋白质组生物学和功能异质性 p < 0.05; n 10.1074 / MCP.M800058-MCP200

      理查德S.

      基因组开放阅读框架自动鉴定推定的甲基转移酶。 尼克斯D. )LLE-AMC(β1)或LSTR-AMC(β2)。在激发波长390nm和发光波长460nm处,使用氟斯基康上升荧光计(Thermo Fishific)测量释放的AMC。每个孔含有0.065μg纯化的20次蛋白酶体。在15分钟间隔测量荧光2小时。所有测定在该范围内是线性的,并且每个样品在全份数中测定。使用向不含蛋白质的孔中加入的不同浓度的游离AMC产生标准曲线。蛋白酶体活性结果表示为平均值±S.E.用于测量细胞溶质级分中的蛋白酶体活性(1小时以100,000×

       搜索本作者的文章

      )我们鉴定了磷酸化,N-末端乙酰化,肌中福利和精氨酸和赖氨酸甲基化的蛋白酶体亚基。使用质谱法和免疫印迹具有特异性抗体的组合方法验证这些结果。兴趣是在心脏和肝20次亚基中检测精氨酸和赖氨酸甲基化。这种形式的翻译后修饰在其他细胞过程中涉及,包括蛋白质贩运,信号转导和转录调节(
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      BN-PAGE / LC-MS / MS的结果表明,心脏和肝脏20秒的蛋白质是不同的( 1618)。添加PP1至心脏20秒的蛋白酶显着增强了β5胰蛋白酶样活性(与热灭活PP1相比的β5胰蛋白酶样活性(50%±2%);虽然PP1对肝20次蛋白酶体的β5胰蛋白酶样活性没有可检测的影响( 0.05, (
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      使用160 / 18O标记和精确质量和时间标签方法的脂多糖给药。
      ,胰蛋白酶消化的心脏和肝20次蛋白酶体带的液相色谱。胰蛋白酶切割的心脏和肝脏20 s蛋白酶的色谱图相似,​​但不同而明显。两个样品中的一些主要峰值都标记为。

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      隔离宽度。在采集期间,动态排除在10.0秒内具有2个重复计数,排除持续时间为40.0秒。为了
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      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
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      ,来自心脏β6蛋白酶体亚基的肽的质谱,其在精氨酸上是单甲基化的;
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      • 杨H.
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      免疫印迹还证明NEDD8是20次蛋白酶体复合物的一部分(
      通过高分辨率共聚焦显微镜和共同免疫沉淀证明了对缔合伙伴验证的额外信心。为了深入了解伴随伴侣对哺乳动物细胞中的蛋白酶体的细胞分布和结合,我们免疫染色哺乳动物细胞并用共聚焦显微镜进行成像。 PP1,CKII,NEDD8和ZFHX4都证实与蛋白酶体复合物共聚合,提供了通过BN-GEL鉴定缔合伴侣的额外信心(
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      PP1抑制剂Calyculin A.数据平均超过3-6个实验。
      网址:网站:McPro-site; ctype:string:日志内容;文章:pii \:pii \:s1535947620306502; pagegroup:string:string:page group;文章视图; wgroup:string:string:迁移的网站;页面:字符串:显示全文;期刊:McPro;问题:问题:PII \:S1535947620x60300; RequestedJournal:Journal:McPro;产品:产品:产品:产品\:产品\:HA
      • 郝杰·卢
      • PEROSA F.
      • arizti p.
      ,天然凝胶的免疫印迹,以验证PP1与心脏20秒蛋白酶的相互作用。
      20秒的蛋白酶体复合物是哺乳动物细胞中细胞内蛋白质降解机制的主要贡献者。系统施用蛋白酶体抑制剂对抗疾病(

       蛋白酶体免疫沉淀 -

      在这项研究中,我们报告了在所有六种20六个蛋白酶体制剂(三种心脏和三种肝化物)中发现的两个蛋白酶组缔合蛋白(NEDD8和伸长系数2)。 NEDD8,也称为Neddylin,是一种泛素状的蛋白质(对遍历泛素的80%同源性)( 尼克斯D. 版权所有©2021美国生物化学和分子生物学协会。由elsevier公司发布代表美国生物化学和分子生物学协会。版权所有。
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      PP1抑制剂Calyculin A.数据平均超过3-6个实验。
      显示用于鉴定NEDD8作为20S蛋白酶体的关联合作伙伴的肽的MS / MS。进行了几个试验实验,以确保在BN页上适当分离多蛋白复合物。用20S络合物鉴定的蛋白质与非20次配合物的蛋白质的比较(在20S蛋白酶体带低于或高于20S蛋白酶体带)中,使得消除诸如胶质纤维酸性蛋白质的错误阳性蛋白质。
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      • Scopus(145)
      )以及已知的相互作用合作伙伴,CKII和先前未知的相互作用伴侣PP1全部观察到质谱法,并通过免疫印迹(数据未示出)验证。
      o:
      BIS-TRIS和0.05%Coomassie G250。对于通过堆叠和分辨凝胶的样品迁移,将电压分别设定为100和500V。在运行时间的三分之一后,用含有0.002%Coomassie G250的缓冲液代替Coomassie染色的阴极缓冲液。
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      • 汉娜J.
      ),并且可能在泛素 - 蛋白酶体系(
      使用Bio-rad蛋白质测定试剂测定蛋白质浓度,并以相等的量加载蛋白质样品并用二维电泳(GE Healthcare)或BN-PAGE进行(如上所述)。在附近(用作背景控制)内染色的蛋白质和未染色的区域被切除,降低,烷基化(Skp1/C已收到: F box) (
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      来自心脏和肝脏的纯化的20 s蛋白酶蛋白水解的蛋白水解活性。
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      纯化的20秒蛋白蛋白酶在非经济型P-40免疫沉淀缓冲液中(50米
      ,
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      该研究确定了肝脏中蛋白酶体抑制的对比改变
      蛋白酶体的蛋白水解活性来自20S络合物的核酸酶。 20秒的蛋白酶对降解氧化蛋白是重要的,并且还已经显示出降解非氧化和非普遍诱导的基材,例如鸟氨酸脱羧酶,P53和P73(
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      ,用抗-20s蛋白酶体α3免疫染色的心肌细胞的代表性单一共焦部分( 宗C. oocyte maturation.
      )。伸长因子2是胞质蛋白质,其从核糖体的P-位点促进新生蛋白链的GTP依赖性易位。其与20 S蛋白酶的相互作用与最近的报告相结合,即伸长因子1与蛋白酶体相互作用(
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      • 克罗斯B.
      ,加入15单位重组CKII后60分钟的β5蛋白水解活性以纯化20次蛋白质。 *,
      o:
      在前五个最强烈的前体离子上碰撞诱导的解离和变焦扫描。变焦扫描质量宽度设定为±5
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      • = 3; *,
      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      所有实验= 3-6。
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      • = 3; *,
      验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
      )。使用免疫印迹,研究了几种对蛋白酶体的翻译后修饰:泛素化,平等,酪氨酸亚硝化,FluthAthionalation,Neddylation和甲基化。虽然发现蛋白酶体馏分是硝基化的,但基于丁基化蛋白的分子量,不含蛋白酶体亚基(Fig. 5所用的缩写是:BN-PAGE,蓝色天然聚丙烯酰胺凝胶电泳; dthiothreitol; PBS,磷酸盐缓冲盐水; PPI,蛋白质邻近指数; CC,相关系数; PKA,蛋白激酶A; pp2a,蛋白质磷酸酶2a; CKII,酪蛋白激酶II; PP1,蛋白质磷酸酶1; LC-MS / MS,液相色谱串联质谱; E1,泛素活化酶; E2,泛素载体蛋白质; E3,泛素蛋白异肽连接酶; AMC,7-氨基-4-甲基香豆素。

       翻译文章

      使用Odyssey System(Li-Cor)检测免疫复合物。通过使用20 s抗体(α3(pw8115),α7(pw8110),β1(pw8140),β2(pw9300),β1i(pw8345),β2i(pw8350),β5i(pw8350),β5i( PW8200),抗滤蛋白(UG9510),抗SUMO-1(PW9460),抗核(PW8155),抗RPT4(PW8830)和来自生物摩洛的抗核糖8(PW9340))和抗甲基碱(7E6, ABCAM),抗甲基氰基(AB23366,ABCAM),抗谷胱甘肽(MAB5310; CHEMICON)和乙酰赖氨酸(MAB5310)和乙酰赖氨酸(05-515)来自升上。使用来自Calbiochem的抗体混合物检测磷酸化蛋白质,提供更完整的磷酸氨基酸表位:抗磷素抗体1c8,4a3,4a9和16b4,并用于检测磷酸化的丝氨酸残基,而抗磷酸胆碱抗体1e11,将4D11和14B3和抗磷酸酪氨酸抗体3B12,2C8,16F4和9H8合并并分别用于磷酸化的苏氨酸或酪氨酸残基。蛋白质载荷由PONCEAT S的瞬间进行控制,在免疫印迹之前,并且代表至少三个重复( okida n。 (
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      • 面包师R.T.
      • 凯茨J.E.
      • eghbali M.
      )。调查纯化的心脏和肝肝20 S的蛋白质表明,肝脏中的胱天蛋白样和胰蛋白酶样蛋白水解活性更大(
      )。我们最近表明,心脏蛋白酶在至少六个残基上磷酸化,并且磷酸化是蛋白酶体的关键调节剂(

       tokumoto t.

      心脏。胞质心脏20秒蛋白酶对两个蛋白酶体抑制剂的敏感性(EpoxoMicin和Z-Pro-NLE-ASP-H)显着高于肝脏。这些功能后果伴随着在这两个器官中观察到的20 s蛋白质的差异蛋白质组生物学。尽管遗传学相同,但这两个器官的20次复合物在其分子组合物中不同,复合组装,翻译后修饰,功能性关联伴侣,调节络合物和蛋白水解功能。据我们所知,这是第一次调查,其中划清了相同动物菌株中20秒蛋白质的组织特异性异质性。
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      和补充图5)。发现β6蛋白酶体亚基在精氨酸上单甲基化,而α2被发现在赖氨酸上是二甲基化(
      ,心脏和肝细胞溶质级分中蛋白酶体亚基的组装指数。组装指数是胞质粒子级分中的蛋白酶体亚基的总量的总量(自由+部分组装+组装亚基)

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        • 钱W.J.
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        下载Hi-Res 2007; 7: 83-97
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        Calyculin A,PP1,DMAT(CKII抑制剂)或CKII对纯化蛋白酶蛋白水解活性的表征的表征。
        Scopus(78) 2006; 6: 129
        • arizti p.
        • 蛋白质组学。
        • 孟德利
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        • 艾略特P.
        • 佩雷斯C.
        多种相关蛋白调节蛋白酶体结构和功能。
        信息图标 2007; 138: 396-397
        • 提交稿件
        • 巴恩斯。
        • 戈麦斯A.V.
        ,加入100 n后50分钟的纯化20s蛋白蛋白酶50分钟的蛋白水解活性
        ),覆盖( 2008; 88: 219-222
        • yeh e.t.
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        • voortman J.
        • 张继夫
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        o标记程序如文献中所述类似地进行(
        下一帧 2005; 17: 645-655
        • yeh e.t.
        • voortman J.
        • 全文
        • 张继夫
        ,使用LC-MS / MS分析鉴定来自BN-PAGE 20 S带中存在的NEDD8的肽。
        面包师R.T. 2005; 19: 316-321
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        用定量质谱法鉴定蛋白质复合物的动态交互。
        侦察 2002; 82: 373-428
        • 抽象的
        • 尚y.
        • 安德森D.J.
        ,对心脏和肝脏细胞骨馏分抑制20s蛋白酶体活性的比较。 *,
        卷列表 2001; 1: 665-676
        • 关闭信息
        • 杨H.
        • = 3; *,
        免疫印迹还证明NEDD8是20次蛋白酶体复合物的一部分(
        没有帐户? 2008; 3: 93-98
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        • = 3; *,
        验证心脏和肝20次蛋白酶蛋白酶组的关联伴侣。
        戈麦斯A.V. 2006; 99: 372-380
        • 尚y.
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        ,来自心脏β6蛋白酶体亚基的肽的质谱,其在精氨酸上是单甲基化的;
        下载数字(PPT) 2007; 6: 2021-2031
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        • J. Clin。 oncol。.
        • 克罗斯B.
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        • 摩尔。细胞。 BIOL。
        ©2009 ASBMB。目前由elsevier公司发布;最初由美国生物化学协会发表的生物化学和分子生物学。
        Scopus(92) 2002; 2: 969-977
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        • 威特S.
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        • SIJTS A.
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        • 肛门。生物学习。
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        • = 3; *,
        在较高放大率下的正方形中的区域。
        戈麦斯A.V. 2006; 99: 362-371
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        • 王X.
        • NISSUM M.
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        • 杨H.
        • 小组4.
        • eghbali M.
        出乎意料的血液中硼芝麻治疗患者的心脏毒性。
        戈麦斯A.V. 2005; 96: 1208-1216
        • 戴维斯R.W.
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        • 沃尔兹T.
        • 小组4.
        • eghbali M.
        )LLVY-AMC。 β1和β2蛋白酶体活性的20 s测定缓冲液的最终组合物为25米
        ,量化使用 2006; 41: 496-510
        • 社论
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        • 懦夫L.
        • 佩雷斯C.
        • ,0.5米
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        • 懦夫L.
        ,PPI作为像素偏移的函数。具有抗核20 S蛋白酶体的免疫染色细胞(E1,
        Scopus(92) 2005; 15: 3876-3884
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        • 绿色
        • ,psign测试
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        使用先前描述的方法从ICR小鼠的心脏和肝脏纯化20S的蛋白酶体复合物(
        糖类研究 2005; 4: 2126-2132
        • P302-315,
        • 下一个数字
        • 等等。
        • BMC癌症。
        • Tricine,15米
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        • 10月1日,
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        • 戈麦斯A.V.
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        • 安德森G.A.
        • 参考
        • 全文PDF.
        • 田云田
        • papandreou c.n.
        Calyculin a(pp1抑制剂; upstate)10分钟或100 n coux o. 哺乳动物蛋白酶体亚群,具有不同分子组合物和蛋白水解活性。
        下载数字(PPT) 2005; 4: 700-709
        • 图3B.
        • 王G.W.
        • 罗宾逊C.V..
        关于作者Glen W. Young的函授信息
        联系信息 1996; 65: 801-847
        • Scopus(145)
        • 马里奥P.
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        • DLAKIC M.
        • 艾略特P.
        • CIRC。 res。
        • Embo J.
        • 懦夫L.
        • 营地D.G.
        收购了400-2000),然后获得了五个次次扫描的MS
        下一帧 2002; 10: 495-507
        • 图8D
        • 研究
        由于蛋白酶体抑制剂Bortezmib,骨髓瘤患者急性严重心脏衰竭。
        下载数字(PPT) 2008; 7: 46-57
        • 臭虫
        • 王Y.
        • minosyan t.y.
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        • Scopus(2162)
        使用160 / 18O标记和精确质量和时间标签方法的脂多糖给药。
        特殊问题 2007; 282: 18448-18457
        • Scopus(114)
        • 联系我们
        PP1抑制剂Calyculin A.数据平均超过3-6个实验。
        下一帧 2005; 18: 263-272
        • 郝杰·卢
        • PEROSA F.
        • arizti p.
        ,天然凝胶的免疫印迹,以验证PP1与心脏20秒蛋白酶的相互作用。
        下载数字(PPT) 2003; 2: 525-540
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        • Scopus(145)
        )以及已知的相互作用合作伙伴,CKII和先前未知的相互作用伴侣PP1全部观察到质谱法,并通过免疫印迹(数据未示出)验证。
        使用饼干 1994; 217: 220-230
        • 下一个数字
        • 图8C.
        • 开放访问
        • 汉娜J.
        ),并且可能在泛素 - 蛋白酶体系(
        特殊问题 1997; 272: 28557-28562
        • peipei ping.
        • 阿兰姆。
        • NaCl,1米
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        • 凯茨J.E.
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        重新分配或重新发布最终文章
        陈L. 2001; 20: 4003-4012
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        • 卵母细胞成熟。
        • 汉娜J.
        纯化的20秒蛋白蛋白酶在非经济型P-40免疫沉淀缓冲液中(50米
        特殊问题 2001; 276: 46655-46660
        • kawakami t.
        • 密码
        • 王G.W.
        • 阿兰姆。
        该研究确定了肝脏中蛋白酶体抑制的对比改变
        下载.ppt. 2001; 155: 571-579
        • 记得我
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        ,用抗-20s蛋白酶体α3免疫染色的心肌细胞的代表性单一共焦部分( 宗C. oocyte maturation.
        BMC癌症。 2003; 4: 6
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        • Doanload .ppt.ppt.
        • elewsvier.
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        • 克罗斯B.
        ,加入15单位重组CKII后60分钟的β5蛋白水解活性以纯化20次蛋白质。 *,
        开放访问徽标 2005; 25: 403-413
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        • 面包师R.T.
        • 凯茨J.E.
        • eghbali M.
        )。调查纯化的心脏和肝肝20 S的蛋白质表明,肝脏中的胱天蛋白样和胰蛋白酶样蛋白水解活性更大(
        Scopus(1002) 1996; 35: 3782-3789
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        和补充图5)。发现β6蛋白酶体亚基在精氨酸上单甲基化,而α2被发现在赖氨酸上是二甲基化(
        以前的数字 2004; 22: 2108-2121